测定意义:
S-PPO 主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放,催化土壤中芳香族化合物氧化成醌,醌与土壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成质和色素,
完成土壤芳香族化合物循环,用于土壤环境修复。
测定原理:
S-PPO 能够催化邻产生有色物质,后者在430nm有特征光吸收。
自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、乙醚 50mL(不允许快递)、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:粉剂×1 瓶,临用前加入 12mL 蒸馏水,用不完的试剂仍 4℃保存;
试剂二:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:乙醚 50mL×1 瓶,4℃保存;(自备)
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 430nm,蒸馏水调零。
2、加样表
试剂名称 |
测定管 |
风干土样(g) |
0.02 |
试剂一(μL) |
120 |
振荡混匀,30℃恒温培养 1 h |
|
试剂二(μL) |
50 |
试剂三(μL) |
430 |
振荡数次,室温静置30min,取200μL上层液于430nm处测定吸光值 A。
注意: 乙醚易挥发,转移至酶标板时建议一次性不要测定太多样本。