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（Solid-Nitrate Reductase，S-NR）试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
产品内容：
试剂一：液体10mL×1 瓶，-20℃保存。
试剂二：液体4mL×1 瓶，-20℃保存。
试剂三：液体12.5mL×1 瓶，4℃保存（如出现结晶析出，60 度水浴溶解后使用）。
试剂四：液体12.5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂五：标准品储备液1mL，-20℃保存。
0.1μmol/mL 标准液的配制：用时将试剂五稀释100倍，即取 0.1ml 加蒸馏水定容至10ml。
产品说明：
S-NR 催化土壤中硝酸盐还原为亚硝酸盐，是土壤硝态氮还原的关键酶。研究S-NR 的活性对合理施肥，降低氮素的损失具有重要意义。
S-NR 催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋ +H 2 O；产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与对–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成红色偶氮化合物；生成的红色偶氮化合物在540 nm有吸收峰，可用分光光度法测定。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
测定操作
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试剂名称 |
1mL带盖离心管 |
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测定管 |
对照管 |
标准管 |
空白管 |
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风干土样（g） |
0.1 |
0.1 |
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0.1μmol/mL 标准液（μL） |
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100 |
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蒸馏水（μL） |
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500 |
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600 |
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试剂一（μL） |
375 |
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375 |
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试剂二（μL） |
125 |
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125 |
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混匀后，盖盖后37℃水浴60min，8000g25℃离心10min，取上清液。 |
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上清液（μL） |
400 |
400 |
400 |
400 |
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试剂三（μL） |
250 |
250 |
250 |
250 |
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试剂四（μL） |
250 |
250 |
250 |
250 |
混匀，显色20min 后，4000g，25℃离心10min，用蒸馏水调零，540nm 下读取各管吸光值。标准管和空白管只需测一次。每个测定管设一个对照管。