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可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
S-SC能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收，其酶促作用产物与土壤中质、氮、磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度密切关，是评价土壤肥力的重要指标。
测定原理：
S-SC催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与3，5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范围内510nm光吸收增加速率与S-SC活性成正比。
自备用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：甲苯5mL×1 瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：液体15mL×1 瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前每瓶加入40mL蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存；
试剂四：液体30mL×1 瓶，4℃保存。
测定步骤和加样表：
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试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
|
风干土样（g） |
0.1 |
0.1 |
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试剂一（μL） |
15 |
15 |
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振荡混匀，使土样全部湿润，37℃水浴 15min |
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试剂二（μL） |
250 |
250 |
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试剂三（μL） |
750 |
|
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蒸馏水（μL） |
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750 |
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充分混匀，放入 37℃水浴培养 24 小时，10000 g，4℃，离心 5min，取上清液 |
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上清液（μL） |
200 |
200 |
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试剂四（μL） |
500 |
500 |
充分混匀，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀，蒸馏水稀释10倍后（可以吸取100μL，加入900μL 蒸馏水稀释；如果吸光度大于4，可以适当加大稀释倍数），510nm处蒸馏水调零，读吸光值 A。计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。