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土壤酸性磷酸酶（Solid-acid phosphatase，S-ACP）活性测定试剂盒微量法
产品内容：
试剂一：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。用前加100mL蒸馏水充分溶解。
试剂三：液体×1瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加576μL无水乙醇（自备），24 μL蒸馏水充分溶解。（变褐色后不能再使用）
标准品：液体×1瓶，0.5 μmol/mL苯酚标准液，4℃保存。
产品说明：
土壤磷酸酶是一类催化土壤磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响，根据适pH范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。
酸性环境中，S-ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出S-ACP活性。
试验中所需的仪器和试剂：
紫外分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
称取风干混匀土壤约0.1g，加入0.05mL甲苯（自备），轻摇15min；加0.4 mL试剂一并且摇匀后，置于37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应24h；到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀，以终止酶催化的反应。10000rpm室温离心10min，取上清液置于冰上待测。
二、测定步骤：
1. 分光光度计预热30 min以上，调节波长到660 nm，蒸馏水调零。
2. 空白管：取微量玻璃比色皿/酶标板，加入10 μL蒸馏水，20 μL试剂三，4 μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水166μL，混匀后室温静置30 min，于660 nm测定吸光度，记为A空白管。
3. 标准管：取微量玻璃比色皿/酶标板，加入10 μL标准液，20 μL试剂三，4 μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水166μL，混匀后室温静置30 min，于660 nm测定吸光度，记为A标准管。
4. 测定管：取微量玻璃比色皿/酶标板，加入10 μL上清液，20 μL试剂三，4 μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水166μL，混匀后室温静置30 min，于660 nm测定吸光度，记为A测定管。