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可见分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
铁元素是一种十分重要的植物营养元素，土壤中铁含量直接影响着植物吸收利用以及生长代谢。
测定原理
在 pH2-9范围内，盐酸羟胺将三价铁转化为二价铁，与邻菲罗琳反应生成橙红色配合物，在510nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。
试剂组成和配制
提取剂：粉剂×1 瓶，4℃保存。
提取液：液体 100mL×2 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。
样本处理
新鲜土样风干，过100目筛，按照土壤质量（g）：提取剂质量(g)为 1：4 的比例（建议称取约0.1g土样，加入0.4g提取剂）缓慢加入提取剂于坩埚中，边加边搅拌均匀，然后在马弗炉中550℃熔融10min，然后在920℃熔融30min，趁热取出坩埚，将熔融物转入烧杯，边搅拌边加4mL提取液，必要时加盖，防止溶液溅出，溶解30min 后，5000g ，25℃离心10min，取上清液待测。
测定操作表
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空白管 |
测定管 |
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样本（μL） |
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100 |
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试剂一（μL） |
100 |
100 |
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试剂二（μL） |
300 |
300 |
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试剂三（μL） |
200 |
200 |
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H2O（μL） |
400 |
300 |
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充分混匀，25℃静置 20min |
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于1mL玻璃比色皿，蒸馏水调零，测定510nm处吸光值 A，分别记为A空白管和A测定管， △A=A测定管-A空白管 |
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