可见分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
土壤中有效硼直接影响着植物的吸收和利用。
测定原理
硼与甲亚胺在弱酸条件下形成棕黄色配合物,在420nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、常温离心机、震荡仪、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。
试剂组成和配制
试剂一:液体 1mL×1 支,4℃保存。
试剂二:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加 10mL 蒸馏水溶解。
样本处理
新鲜土样风干,过100目筛,按照土壤质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:2的比例(建议称取约0.5g土样,加入1mL蒸馏水)加入蒸馏水,沸水中浸提10min,待自然冷却,加入50μL试剂一,震荡5min,8000g ,25℃离心10min,取上清液待测。
测定操作表
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空白管 |
测定管 |
样本(μL) |
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200 |
试剂二(μL) |
400 |
400 |
试剂三(μL) |
200 |
200 |
H 2 O(μL) |
400 |
200 |
充分混匀,25℃黑暗中静置 1h |
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于1mL玻璃比色皿,蒸馏水调零,测定420nm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管, △A=A 测定管-A 空白管 |