可见分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
产品内容:
试剂一:甲苯5mL×1 瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×2 瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入10mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:液体25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:液体50mL×1 瓶,4℃保存;
产品说明:
S-α-GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
S-α-GC 能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm 有特征光吸收。
自备实验用品及仪器:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
测定操作:
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
风干土样(g) |
0.05 |
0.05 |
试剂一(μL) |
25 |
25 |
振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置15min |
||
试剂二(μL) |
400 |
|
试剂三(μL) |
500 |
500 |
混匀, 37℃水浴1h 后,立即95℃水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却 |
||
试剂二(μL) |
400 |
试剂二(μL) |
充分混匀,10000g25℃离心10min,取上清液 |
||
上清液(μL) |
500 |
500 |
试剂四(μL) |
1000 |
1000 |
充分混匀,室温静置2min后,400nm处蒸馏水调零,测定吸光值A,计算ΔA=A 测定管-A
对照管。每个测定管设一个对照管。