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微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
血磷主要指血中的无机磷，以无机磷盐的形式存在。血浆中钙、磷浓度关系密切，在以 mg/dL表示时，二者的乘积(［Ca］×［P］)为 30～40。当(［Ca］×［P］)>40，则钙和磷以骨盐形式沉积于骨组织；若(［Ca］×［P］)<35 则妨碍骨的钙化，甚至可使骨盐溶解，影响成骨作用。血钙和血磷含量的相对稳定依赖于钙、磷的吸收与排泄和钙化及脱钙两种代谢的相对平衡。上述平衡受到维生素 D3、甲状旁腺素和降钙素等激素的调节。
测定原理：
去除血清中磷后，无机磷盐与钼酸铵试剂生成菱酸，被铁还原后呈蓝色，在620nm有光吸收；通过测定620nm吸光度，计算血液中磷含量。
自备仪器和用品：
离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、和蒸馏水。
试剂组成和配置：
试剂一：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。 临用前配制，依次加入11mL蒸馏水充分溶解，再加入试剂二，充分混合。
标准液：液体×1 支，1mmol/L无机磷，4℃保存。
血磷浓度测定操作：
1. 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到620nm，蒸馏水调零。
2. 取出标准液，室温解冻。
3. 血清预处理：吸取50μL血清，加950μL试剂一，混匀后室温8000rpm，离心10min，取上清液，待测。
4. 空白管：取微量石英比色皿/96孔板，依次加入50μL蒸馏水，50μL试剂一，100μL试剂
三，混匀后静置10min，于620nm测定吸光度，记为A空白管。
5. 标准管：取微量石英比色皿/96孔板，依次加入50μL标准液，50μL试剂一，100μL试剂
三，混匀后静置10min，于620nm测定吸光度，记为A标准管。
6. 测定管：取微量石英比色皿/96孔板，依次加入50μL上清液，50μL试剂一，100μL试剂
三，混匀后静置10min，于620nm测定吸光度，记为A测定管。
注意：空白管和标准管只需测定一次。