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可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
哺乳动物血液中的葡萄糖称为血糖，是其体内糖的主要运输形式。血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定，调节失衡时出现高血糖和低血糖。、颅内压增加和脱水症
等均可引起高血糖；饭后，精神紧张也可出现生理性高血糖。相反，胰岛 β 细胞增生或肿癌
等，垂体、肾上腺皮质和甲状腺功能减退，以及严重肝病患者均可出现低血糖症状。此外，饥饿和剧烈运动可引起暂时的低血糖。
测定原理：
葡萄糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在 505nm 有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：0.5mmol/L 葡萄糖溶液 10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 25ml×1 瓶，4℃保存；
试剂三：液体 25ml×1 瓶，4℃保存；
测定步骤
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 505nm，蒸馏水调零。
2、混合试剂的配制：使用前将试剂二和试剂三 1:1 等体积混合，用多少配多少。
3、加样表（在 EP 管中加入下列试剂） ：
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试剂名称（μL） |
空白管 |
标准管 |
测定管 |
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血清 |
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100 |
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试剂一 |
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100 |
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蒸馏水 |
100 |
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混合试剂 |
900 |
900 |
900 |
混匀，置 37℃水浴中，保温 15min，于 505nm 波长处读取吸光度 A。空白管、标准管和测定管吸光值分别记为 A1、A2 和 A3。空白管和标准管只要做一管。
血糖含量计算：
血糖含量（μmol/mL）= C 标准×(A3-A1)÷(A2-A1)=0.5×(A3-A1)÷(A2-A1)
C 标准：标准管浓度，0.5µmol/mL。
注意：检测限为 1nmol/mL