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可见分光光度法
产品简介：
糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一，也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖是指样品中的还原单糖及在本法测定条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解为葡萄糖的淀粉。
检测原理为蒽酮比色法。可用于可溶性单糖、寡糖和多糖的含量测定，具有灵敏度高﹑简便快捷﹑适用于微量样品的测定等优点。
试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、浓硫酸、研钵和蒸馏水。
产品内容：
试剂一：粉剂×1瓶，4℃避光保存；
试剂二：10ml×1瓶，4℃保存；
操作步骤：
一、样品中可溶性糖的提取：
称取约0.1～0.2g 样本，加入1ml 蒸馏水研磨成匀浆，倒入有盖离心管中，沸水浴10 min（盖紧，以防止水分散失），冷却后，8000g，常温离心10min，取上清液于10ml 试管中，用蒸馏水定容至10ml，摇匀备用。
二、测定操作表：
1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至620nm，蒸馏水调零。
2. 调节水浴锅至95℃。
3. 工作液的配制：在试剂一中加入5 ml试剂二，充分溶解后使用，如较难溶解，可加热搅拌。
4. 加样表（在EP管中反应)：
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试剂（μl） |
空白管 |
测定管 |
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样本 |
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200 |
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蒸馏水 |
400 |
200 |
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工作液 |
100 |
100 |
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浓硫酸 |
1000 |
1000 |
混匀，置95℃水浴中10min（盖紧，以防止水分散失），冷却至室温后，于620nm 处，分别读取空白管和测定管吸光值，ΔA=A测定管-A空白管。
注意：
1. 空白管只要做一管。
2. 如果ΔA大于1，需要将样本用蒸馏水稀释，计算公式中乘以相应稀释倍数。
3. 由于浓硫酸具有强腐蚀性，请谨慎操作。