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可见分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定
产品内容：
试剂一：液体10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体10mL×1 瓶 ，4℃保存。
产品说明：
山梨醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是糖运输形式之一，而且与生物抗逆性和食物风味密切相关。因此，在糖代谢、抗逆性和食品研究中经常需要检测山梨醇含量变化。
山梨醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物，在655nm 波长有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、山梨醇的提取：
按照组织质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.2g 组织，加入2mL蒸馏水），研磨成匀浆， 95℃水浴10 分钟（盖紧，以防止水分散失），冷却后，8000g，25℃离心10min，取上清液待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热30min 以上，调节波长至655nm，蒸馏水调零。
2、加样表（在EP 管中依次加入下列试剂）：
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试剂（μL） |
空白管 |
测定管 |
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试剂一 |
150 |
150 |
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试剂二 |
140 |
140 |
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样本 |
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1000 |
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蒸馏水 |
1000 |
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混匀后室温静置15min，8000g，25℃离心10min，取上清液测655nm 下吸光值A，计算ΔA=A测定管-A 空白管。空白管只要做一管。