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可见分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应
用于酿造和饲料工业中，BAX 一般分离自适生长pH为9 -11的微生物。
测定原理
BAX 在碱性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在540nm处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在540nm吸光值增加速率，可计算BAX活力。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、恒温水浴锅，可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制
缓冲液：液体 65mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。
粗酶提取
1. 发酵液：发酵液于8000g，4℃，离心15min，取上清，作为待测样品。
2. 酶干粉：称约0.1mg，加缓冲液1mL，震荡溶解待测。
测定操作表
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对照管 |
测定管 |
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样品（μL） |
200 |
200 |
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缓冲液（μL） |
300 |
300 |
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试剂一（μL） |
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200 |
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试剂二（μL） |
300 |
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混匀，盖紧瓶盖，50℃水浴，反应 30min，立即沸水浴 10min 灭活。(注意不要让盖子爆开， 以免进水，改变了反应体系) |
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试剂一（μL） |
200 |
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试剂二（μL） |
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300 |
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混匀，沸水浴显色5min( 注意不要让盖子爆开，以免进水改变了反应体系)，1mL玻璃比色 皿，对照管调零，测定 A540 。 |
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