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紫外分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
果胶裂解酶（EC4.2.2.10）是果胶酶的重要组成部分，是一种能降解植物细胞壁，导致植物组织软化甚至死亡的解聚酶，来源比较广泛，主要来源于微生物，可用于果汁、果酒的澄清，提高水果出汁率，植物病毒的纯化，纸浆的漂白和纺织品的生物精炼，在减少环境污染和降低能源消耗方面具有潜在的应用价值。
测定原理
果胶裂解酶作用于果胶中的α-1,4糖苷键，生成在还原端C4和C5之间位置具有不饱和键的不饱和寡聚半乳糖醛酸，在235nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、恒温水浴锅。
试剂组成和配制
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 30mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。
酶液提取
1．组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，
加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。10000g ，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2．细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃离心10min，取上清置于冰上待测。
3. 培养液：直接测定。
测定操作表
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对照管 |
测定管 |
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试剂一（μL） |
600 |
600 |
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40℃温育3min |
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酶液（μL） |
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100 |
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试剂二（μL） |
300 |
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混匀，40℃反应30min |
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酶液（μL） |
100 |
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试剂二（μL） |
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300 |
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混匀，对照管调零，1mL 石英比色皿测定 235nm 处吸光值 A。 |
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