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上海酶科生物科技有限公司

ELISA Kit,生化试剂盒,气相、高效液相代测

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果胶酯酶测试盒 货到付款
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产品: 浏览次数:29果胶酯酶测试盒 货到付款 
品牌: 上海酶科
产品货号: YX-C-B628
产品规格: 20样
最小起订量: 1 盒
供货总量: 10000 盒
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2020-03-09 13:14
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详细信息
 果胶酯酶(pectinesterasePE)试剂盒说明书

电位滴定法

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

果胶酯酶属果胶酶系,催化水解果胶中甲氧基生成果胶酸,从而增加果胶在水中的溶解度,广泛存在于高等植物和可以降解细胞壁的细菌和真菌中,起内源调控植物细胞壁上及细胞之间果胶含量的作用,在食品工业中具有及其重要的作用和开发前景。

测定原理

果胶酯酶催化水解果胶分子释放H +,是反应体系的的pH下降,用碱液保持体系的pH始终保持在7,通过碱消耗的量反映果胶酯酶的活性。

需自备的仪器和用品

天平、研钵、常温离心机、自动电位滴定仪。

试剂的组成和配制

提取液:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前每瓶加双蒸水100mL 充分溶解。

试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加少量蒸馏水于50℃加热溶解,冷却后转入1L容量瓶,用蒸馏水定容。

试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加少量蒸馏水溶解,转入1L容量瓶,用蒸馏水定容。

样品处理

将组织样品捣碎,按照样品质量(g)和提取液体积(mL)1: 10的比列(建议取约0.5g样品,加入5mL提取液)冰浴研磨,再于8000g4℃离心15min,取上清液待测。

测定操作

1. 试剂一于50℃保温 10min,同时打开电位滴定仪,用蒸馏水清洗仪器。

2. 用试剂二补液,补液结束后用取50mL试剂一,用试剂二滴定到pH7

3. 加入待测样品5mL,将滴定延迟时间设为180s,用试剂二滴定至pH7

4. 滴定结束后记录消耗的试剂二体积 VmL)和滴定至终点所需时间 TS)。

计算公式

酶活定义:每g组织每秒钟消耗 NaOH 的量定义为一个酶活单位。

PE 活性(U/g= V/(T-180)×F/W

V:滴定所消耗的 NaOH 的量,mLT-180:反应时间,SF:样品稀释倍数;W:样品质量,g

注意事项

1. 补液结束后检查输液管中是否有气泡,有气泡要补液清除气泡后再进行样品滴定。

2. 实验前先做预实验,如果酶活力太高,滴定超过5min不能达到滴定终点,则需要将样品稀释2-5倍进行测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。

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