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微量法
正式测定前请选择2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一，也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖也可称为碳水化合物，包括可溶性的单糖，二糖以及不溶性的淀粉，纤维素，几丁质等。
测定原理：
总糖酸水解为还原糖，在 NaOH 和丙三醇存在下，DNS 试剂与还原糖共热后被还原成氨基
化合物，在过量的 NaOH 碱性溶液中呈桔红色，在 540nm 处有吸收峰，以此测定样品中的总糖含量。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 100mL×1 瓶 ，4℃保存；
试剂三：液体 5mL×1 瓶 ，4℃避光保存
标准品：粉剂×10mg支，4℃保存；临用前加入 1mL 蒸馏水溶解，制备 10mg/mL 葡萄糖标准液。
样品中总糖的提取：
称取约 0.1g 样品，加入 1mL 试剂一，1.5mL 蒸馏水，匀浆，95℃水浴中加热 30min，加入1mL 试剂二，混匀，用蒸馏水定容至 10mL，8000g 25℃离心 10min，取上清液待测。（注意稀释，见注意事项）
测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2、调节水浴锅至95度。
3、加样表 ：
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试剂（μL） |
标准管 |
测定管 |
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样本 |
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8 |
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标准品 |
8 |
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蒸馏水 |
8 |
8 |
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试剂三 |
12 |
12 |
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混匀，置 95 度水浴中 10min（盖紧，以防止水分散失），冷却至室温 |
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蒸馏水 |
172 |
172 |
注意：如果ΔA大于3，需要将上清液用蒸馏水稀释，计算公式中乘以相应稀释倍数。