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植物蔗糖酶（sucrase）试剂盒说明书
可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的关键酶之一，能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收。
测定原理：
本试剂盒采用3.5－二硝基水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量，由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5－二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物，在
一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。此法操作简便、迅速、杂质干扰较小。
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、沸水浴、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体60mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体2.5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1支，4℃保存，用时加入1.5mL 蒸馏水充分溶解；用不完的试剂4℃可保存一周；
试剂三：液体 5mL×1 瓶，常温保存；
样品测定的准备：
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
加样表和测定步骤：
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试剂名称（μL） |
对照管 |
测定管 |
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试剂一 |
50 |
50 |
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蒸馏水 |
50 |
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样本 |
100 |
100 |
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试剂二 |
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50 |
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置于 25℃准确水浴 10min |
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试剂三 |
100 |
100 |
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混匀，95℃水浴 5min 左右（盖紧，防止水分散失），冷却至室温 |
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蒸馏水 |
700 |
700 |
混匀，520nm蒸馏水调零，测定各管吸光值，ΔA=A测定-A对照，每个测定管设一个对照管。