上海酶科生物科技有限公司

可见分光光度法

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定  

产品内容：  

试剂一：50mL×1 瓶，常温保存，若有黄色晶体析出，需加热溶解后再用； 

试剂二：40mL×1 瓶，4℃保存。 

产品说明： 

淀粉酶负责水解淀粉，主要包括 α-淀粉酶和 β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可随机地作用于淀粉中的 α-1,4-糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖。   

还原糖还原 3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。α-淀粉酶不耐酸，β-淀粉酶不耐热。根据上述特性，钝化其中之一，就可测出另一种淀粉酶的活力。 

需自备的仪器和用品：  

可见分光光度计、恒温水浴锅、离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。 

操作步骤：

一、粗酶液提取：  

称取 0.1~0.2g 样本（建议称取约 0.1g 样本），加入1mL 蒸馏水，研磨匀浆；将匀浆倒入离心管中，提取液在室温下放置提取 15min，每 5min 振荡1次，使其充分提取；3000g，25℃离心 10min，取上清液加蒸馏水定容至10 mL，摇匀，即淀粉酶原液。 

吸取上述淀粉酶原液 1mL，加入4mL 蒸馏水，摇匀，即为淀粉酶稀释液，用于（α＋β）淀粉酶总活力的测定。 

二、测定步骤：  

1、分光光度计预热30min以上，调节波长到540 nm，蒸馏水调零。 

2、测定操作表