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紫外分光光度法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
磷酸丙糖异构酶是重要的糖酵解酶，广泛存在于动植物及微生物体内，在机体内参与葡萄糖代谢，在糖酵解，糖异生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代谢中都发挥着重要作用。
测定原理
磷酸丙糖异构酶将磷酸二羟丙酮转化为 3-磷醛，3-磷醛与 NAD 在 3-磷醛脱氢酶的作用下生成 3-磷酸和 NADH，340nm 处的吸光度变化反映了磷酸丙糖异构酶的活性的高低。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1mL石英比色皿。
试剂组成和配制
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 30mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂二：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。临用前加 5mL 蒸馏水充分溶解。
试剂三：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。临用前加 5 mL 蒸馏水充分溶解。
试剂四：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。临用前加 5 mL 蒸馏水充分溶解。
酶液提取
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清置冰上待测。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后4℃，10000g 离心 10min，取上清置冰上待测。
3. 液体：直接检测。
测定操作
1. 分光光度计预热30min，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2. 取1mL石英比色皿，依次加入600μL试剂一，100μL试剂二，100μL试剂三，100μL试剂四，100μL 粗酶液，充分混匀，记录 340nm 处 10s 的吸光值 A1 和310s的吸光值 A2，△A=A2-A1