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可见分光光度法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
Glu 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是组成蛋白质的 20 种氨基酸之一，而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成，是生物体内主要氨基来源之一。此外，Glu 还是味精的主要有效成分，常用做食品添加剂以及香料生产。
测定原理：
利用提取液提取，然后用显色剂进行显色，显色后在570nm下进行测定。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 10mL 蒸馏水，充分混匀溶解，用不完的试剂仍 4℃保存。
谷氨酸提取：
1、细菌或培养细胞样品：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议1000万细菌或细胞加入2mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 常温离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、组织样品：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.2g 组
织，加入2mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g 常温离心 10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）或细胞培养液样品：按照血清（浆）或细胞培养液体积（mL）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议取0.2mL血清（浆）或者细胞培养液加入2mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g常温离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。
2、在有盖 EP 管中加入下列试剂：
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试剂名称（μL） |
测定管 |
对照管 |
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样本 |
1000 |
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试剂一 |
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1000 |
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试剂二 |
200 |
200 |
混匀，90℃水浴 20min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却，于 570nm波长处比色，△A=A
测定管-A 对照管。对照管只要做一管。
注意事项：
为提高检测灵敏度，测定管的吸光值应小于1，若大于1则需要将上清液用试剂一稀释至适当倍数后测定，计算公式中乘以相应稀释倍数。