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微量法
产品简介：
HYP是机体胶原蛋白主要成分之一，胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等，因此HYP含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。
样品经水解产生游离的HYP，进一补被氯胺T氧化，氧化产物与对二甲氨基苯甲醛反应，产生红色化合物，在560nm处有特征吸收峰。通过测定样品水解液560nm吸光值，可计算HYP含量。
产品内容：
组织提取液：6mol/L盐酸，自备。浓盐酸：H2O（V/V）= 1:1，室温保存；
细胞提取液：液体100mL×1 瓶，4 ℃保存；
试剂一：液体10mL×1 瓶，4 ℃避光保存；
试剂二：液体10mL×1 瓶，4 ℃避光保存。
操作步骤：
一、羟脯氨酸提取：
1. 组织：取约0.2g 样品于玻璃管，加入2mL的组织提取液，置于110℃烘箱，水解6至12小时，16000rpm，25℃，离心20min，用提取液定容至2mL，取上清待测。
2. 细胞：取约500 万个细胞，加入1mL 的细胞提取液，于高压消毒器中15 磅保持30min，自然降压后待测。
二、测定操作：
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对照管 |
测定管 |
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样本（uL） |
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60 |
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试剂一（uL） |
60 |
60 |
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混匀，室温静置20min |
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试剂二（uL） |
60 |
60 |
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H2O（uL） |
180 |
120 |
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混匀，60℃，20min，取出后室温静置15 min，测定A560。(A560=A测定-A对照) |
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