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上海酶科生物科技有限公司

ELISA Kit,生化试剂盒,气相、高效液相代测

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羧酸酯酶(CarE)测试盒 货到付款
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产品: 浏览次数:33羧酸酯酶(CarE)测试盒 货到付款 
品牌: 上海酶科
产品货号: YX-C-B003
产品规格: 50管/48样;100管/96样
最小起订量: 1 盒
供货总量: 10000 盒
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2020-03-09 13:15
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详细信息
 羧酸酯酶(CarE)活性测定试剂盒说明书

微量法

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

哺乳动物 CarE,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于丝氨酸水解酶家族。CarE 催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。CarE 参与脂质运输和代谢,并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的和代谢有关,磷农药可结合并且抑制 CarE 活性。

测定原理:

CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固篮显色;在450nm光吸收增加速率,计算CarE活性。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。

试剂组成和配置:

试剂一:液体×1 瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1 瓶(棕色),4℃避光保存(收货后一周内完成测定)。

粗酶液提取:

1、细菌、细胞样品制备

收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每200万细菌或细胞加入400μL试剂一,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次);12000g 4℃离心30min,取上清液待测。

2、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆;12000g 4℃离心 30min,取上清液待测。

3、液体:直接测定

测定操作:

1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到450nm,蒸馏水调零。

2. 试剂二置于37℃水浴中预热30min。

3. 空白管:取微量玻璃比色皿/96孔板,依次加入5μL蒸馏水和200μL试剂二,迅速混匀,

于450nm处测定3min内吸光值变化,第10s吸光值记为A1,第190s吸光值记为A2。△A空白管=A2-A1

4. 测定管:取微量玻璃比色皿/96 孔板,依次加入5μL上清液和200μL试剂二,迅速混匀,于450nm处测定3min内吸光值变化,第10s吸光值记为A3,第190s吸光值记为A4。△A测定管=A4-A3

注意:空白管只需测定一次。

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