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上海酶科生物科技有限公司

ELISA Kit,生化试剂盒,气相、高效液相代测

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谷氨酸脱氢酶(GDH)测试盒 货到付款
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产品: 浏览次数:13谷氨酸脱氢酶(GDH)测试盒 货到付款 
品牌: 上海酶科
产品货号: YX-C-A803
产品规格: 50管/48样;100管/96样
最小起订量: 1 盒
供货总量: 10000 盒
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2020-03-09 13:15
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详细信息
 谷氨酸脱氢酶(Glutamate dehydrogenaseGDH)试剂盒说明书

紫外分光光度法

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

GDHEC 1.4.1.2)广泛分布于植物中,和谷氨酸合成酶(GOGAT)共同参与谷氨酸的合成,在氨同化和转化成氮化合物的代谢中起重要作用。

测定原理:

GDH催化NH4+ 、α-酮戊二酸和NADH,生成谷氨酸和NAD+,引起340nm吸光度下降。通过测定340nm吸光度的下降速率,计算GDH活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1 支,4℃保存;

试剂三:粉剂×1 支,4℃保存;

试剂四:粉剂×1 支,-20℃保存。

粗酶液提取:

1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~10001 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

3、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:

1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。

2、 样本测定

1)工作液的配制:临用前将试剂二、三、四转移到试剂一中混合溶解,置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 5min;现配现用;

2)取 0.05mL样本和1mL工作液于1mL比色皿中,混匀,加工作液的同时开始计时,在340 nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1520秒时的吸光度A2,计算 ΔA=A1-A2

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