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分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
在食品中，亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更安定，在食品加工业中作为保色剂，以维持肉制品的良好外观，并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生，提高食用肉制品的安全，但是人体
长期摄入亚硝酸盐过量的食品，可诱发消化系统癌变。
测定原理
在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物，再与 N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物，在 540nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵或匀浆器、水浴锅、分光光度计、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液一：液体 50 mL×1 瓶，室温保存。
提取液二：液体 50 mL×1 瓶，室温保存。
提取液三：液体 50 mL×1 瓶，室温保存。
提取液四：粉剂 100 mg ×1 支，室温保存。
试剂一：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。
样品处理
称取样品约1g，破碎，加入1mL提取液一，沸水浴15min，冷却至室温，加入1mL提取液二，震荡摇匀，加1mL提取液三，用镊子加少量提取液四（约2 mg），静置30min，25℃，8000g 离心15min，取上清液待测。
测定步骤和操作表
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空白管 |
测定管 |
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样品（µL） |
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500 |
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试剂一（µL） |
500 |
500 |
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试剂二（µL） |
500 |
500 |
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H2O |
500 |
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混匀，25℃静置 15min，1mL 玻璃比色皿，空白管调零，测定 A 540 |
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注意：空白管只需测定一次。