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分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
硝态氮是植物主要的氮源。植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况，可作为土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且
对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
测定原理
在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可比色测定计算得硝态氮含量 。
自备实验用品及仪器
蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
试剂组成和配制
试剂一：粉剂×2瓶，4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加2mL浓硫酸充分溶解。
试剂二：液体100mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 支，4℃保存。
样本处理
按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL 蒸馏水）加入蒸馏水，室温匀浆后置于90℃恒温水浴锅中浸提30min，期间不断晃动或者置于 90℃恒温摇床中振荡提取 30min，待冷却后于 25℃，12000g 离心 15min，取上清待测。（深色植物匀浆后加入约3mg试剂三后再提取）
测定操作表
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空白管 |
测定管 |
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样本（μL） |
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20 |
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蒸馏水（μL） |
20 |
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试剂一（μL） |
80 |
80 |
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充分混匀，25℃静置 30min |
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试剂二（μL） |
1900 |
1900 |
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混匀，25℃静置5min，取1mL于1mL玻璃比色皿中测定410nm处吸光值 A， △A=A 测定管-A 空白管 |
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注意：空白管只需测定一次。