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可见分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
氮素是构成生物体的一种必需元素，自然界中的氮素循环包括许多转化作用。空气中的氮气被固氮微生物及植物与微生物的共生体固定成氨态氮，经过硝化微生物的作用转化成硝态氮，后者被植物或微生物同化成氮化物，植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。
测定原理
α-氨基酸与水合茚三酮溶液一起加热，经氧化脱氨变成相应的 α-酮酸，酮酸进一步脱羧变成醛，水合茚三酮则被还原，在弱酸环境中，还原型茚三酮，氨和另一分子水合茚三酮反应，缩合生成蓝紫色物质，在 580nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。
试剂组成和配制
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1 支，4℃避光保存。临用前加 0.5mL 蒸馏水充分溶解。
试剂三：液体 25mL×1 瓶，4℃保存。
样本处理
按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL 提取液）加入提取液，室温匀浆后于 25℃，12000g 离心 10min，取上清待测。
测定操作表
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空白管 |
测定管 |
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样本（μL） |
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200 |
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蒸馏水（μL） |
200 |
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试剂一（μL） |
300 |
300 |
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试剂二（μL） |
10 |
10 |
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充分混匀，沸水浴 5min 后自然冷却 10min |
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试剂三（μL） |
500 |
500 |
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充分混匀，于 1mL 玻璃比色皿，蒸馏水调零，测定 580nm 处吸光值 A，分别记为 A 空白管和 A 测定管，△A=A 测定管-A 空白管 |
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注意：空白管只需测定一次。