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可见分光光度法
产品内容：
标准品：液体1mL×1 支，4℃保存。
试剂一：粉剂×1 瓶，4℃避光保存，临用前加10mL 蒸馏水充分溶解。
试剂二：液体20mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体20mL×1 瓶，4℃避光保存。
产品说明：
尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物，在尿酶催化下分解转化成氨。血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。在碱性条件下，尿酶水解尿素产生氨，氨与次氯酸反应生成氯胺，再与酚衍生物作用生成绿色吲哚酚，在630nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计、1ml玻璃比色皿、恒温水浴锅。
操作步骤：
一、样品处理
1. 组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5-10 的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水），匀浆后于25℃，12000rpm 离心10min，取上清待测。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：蒸馏水体积（mL）为500-1000：1 的比例（建议500万个细胞加入1mL 蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3 s，间隔7 s，总时间3min）；然后4℃，10000g 离心10min，取上清置于冰上待测。
3. 血清或其它液体：直接检测。
二、测定操作
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空白管 |
标准管 |
测定管 |
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样品（μL） |
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100 |
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标准品（μL） |
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100 |
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H2O（μL） |
100 |
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试剂一（μL） |
200 |
200 |
200 |
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充分混匀，于37℃反应10min |
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试剂二（mL） |
350 |
350 |
350 |
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试剂三（mL） |
350 |
350 |
350 |
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充分混匀，于37℃显色10min，于微量石英比色皿，双蒸水调零，测定630nm 处吸光值，记为A 空白管、A 标准管和A 测定管 |
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