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上海酶科生物科技有限公司

ELISA Kit,生化试剂盒,气相、高效液相代测

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谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)测试盒 货到付款
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产品: 浏览次数:23谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)测试盒 货到付款 
品牌: 上海酶科
产品货号: YX-C-A202
产品规格: 50管/48样;100管/96样
最小起订量: 1 盒
供货总量: 10000 盒
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2020-04-07 17:34
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详细信息
 谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)

试剂盒说明书

紫外分光光度法

注意:正是测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

产品内容

试剂一:液体×1 瓶,4保存。

试剂二:粉剂×1 瓶,4保存。

试剂三:液体×1 支,-20保存。

混合试剂配制:临用前,在试剂二中加入试剂一40 mL,充分震荡溶解后加入全部试剂三,混匀。(注意:必须现配现用,当天使用完

试剂四:液体×1 瓶,4保存。

产品说明:

GSH-Px 是谷胱甘肽氧化还原循环中催化还原型谷胱甘肽(GSH)氧化的主要酶之一。GSH-Px不仅能够特异地催化还原型谷胱甘肽与ROS反应,生成氧化型谷胱甘肽GSSG,从而保护生物膜免受ROS 的损害,维持细胞的正常功能;而且具有保护肝脏、提高机体免疫力、拮抗有害金属离子对机体的伤害和增加机体抗辐射等能力。

GSH-Px 催化H2O2氧化GSH,产生GSSG;谷胱甘肽还原酶(GR)催化NADPH 还原GSSG,再生GSH,同时NADPH 氧化生成NADP+NADPH 340 nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340 nm光吸收减少速率来计算GSH-Px 活性。

自备仪器和用品:

紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL 石英比色皿和蒸馏水。

操作步骤:

一、粗酶液提取:

1. 组织:按照组织质量(g:试剂一体积(mL)15~10 的比例(建议称取0.1g 组织,加入1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。10000rpm4离心10min,取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌:按照细胞数量104个:试剂一体积(ml500~1000:1 的比例,建议500 万细胞加入1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(率300w,超声3 s,间隔7s,总时间3min)然后10000rpm4,离心10min,取上清置冰上待测。

3. 血清等液体:直接测定。

二、测定操作:

1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。

2. 混合试剂在25或者37(哺乳动物)水浴中预热30min 以上。

3. 空白管:依次在1mL石英比色皿中加入100μL 蒸馏水、800μL 预热的混合试剂,100μL试剂四,迅速混匀后于340nm处测定第10 s和第190s的吸光值,分别记为A1A2,A 空白管= A1A2

4. 测定管:依次在1mL 石英比色皿中加入100μL 上清液、800μL 预热的混合试剂,100μL试剂四,迅速混匀后于340nm 处测定第10 s和第190s 的吸光值,分别记 A1 A2A 测定管= A1A2

注意:空白管只需测定一次。

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