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上海酶科生物科技有限公司

ELISA Kit,生化试剂盒,气相、高效液相代测

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丙二醛(MDA)测试盒 货到付款
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产品: 浏览次数:39丙二醛(MDA)测试盒 货到付款 
品牌: 上海酶科
产品货号: YX-C-A401
产品规格: 50管/48样;100管/96样
最小起订量: 1 盒
供货总量: 10000 盒
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2020-04-07 17:34
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详细信息
 丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量试剂盒说明书

可见分光光度法

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括 MDA。通过检测 MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平。

测定原理:

MDA 与硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在 532nm有吸收峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定 600nm 下的吸光度,利用 532nm与 600nm 下的吸光度的差值计算 MDA 的含量。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配置:

提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 30mL×1 瓶,4℃保存;

注意事项:

临用前注意试剂一是否完全溶解,如未溶解,可以 70℃加热,并振荡以促进溶解。

MDA 提取:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,

加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:

1、吸取 0.6mL试剂一于1.5mL 离心管中,再加入0.2mL 样本, 混匀。

2、95℃水浴中保温 30min(盖紧,防止水分散失),置于冰浴中冷却,10000g,25℃,离心

10min。

3、吸取上清液于1mL玻璃比色皿中,测定532nm和600nm处的吸光度,记为A532 和A600,

ΔA= A532-A600。蒸馏水调零

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