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上海酶科生物科技有限公司

ELISA Kit,生化试剂盒,气相、高效液相代测

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黄嘌呤氧化酶(XOD)测试盒 货到付款
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产品: 浏览次数:32黄嘌呤氧化酶(XOD)测试盒 货到付款 
品牌: 上海酶科
产品货号: YX-C-A402
产品规格: 50管/48样;100管/96样
最小起订量: 1 盒
供货总量: 10000 盒
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2020-04-07 17:34
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详细信息
 黄嘌呤氧化酶(xanthione oxidase,XOD)试剂盒说明书

紫外分光光度法

正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

XOD(EC 1.17.3.2)催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子,是活性氧主要来源之一;同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD主要分布于哺乳动物的心,肺,肝脏等组织中,当肝功能受损时,XOD大量释放到血清中,对肝损害的诊断具有特异性的意义。

测定原理:

XOD催化黄嘌呤产生尿酸,尿酸在290nm下有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:60mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:60mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×4 瓶,4℃保存。

粗酶液提取:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

操作步骤:

1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 290nm,蒸馏水调零。

2、XOD 检测工作液的配制:用时在每瓶试剂二中加入 15mL 试剂一,充分混匀,待用;用

不完的试剂 4℃可保存一周;

3、测定前将 XOD 检测工作液 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min。

4、取 1mLXOD 检测工作液于 1mL 石英比色皿中,再加入 35μL 样本,混匀,室温下立即

测定 290nm下的初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A2-A1。

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