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可见分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物（肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等）、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛，其活性与核酸和蛋白合成密切相关，能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤
程度。
测定原理
DAO催化尸胺产生醛和过氧化氢，外源添加过量的辣根过氧化物酶，催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成氧化型邻联茴香胺，在460nm 处有特征吸收峰，通过测定该波长吸光度增加速率，计算 DAO 活性。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液：液体 80mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 0.5mL×1 支，4℃保存。
试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
粗酶液提取
1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃离心 20min，取上清，置冰上待测。
2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建
议 500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔 7秒，总时间 3min）；然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体：直接测定。
测定操作表
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对照管 |
测定管 |
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粗酶液（μL） |
250 |
250 |
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提取液（μL） |
640 |
540 |
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试剂一（μL） |
10 |
10 |
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试剂二（μL） |
100 |
100 |
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试剂三（μL） |
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100 |
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混匀，37℃水浴 30min，1mL 玻璃比色皿，对照管调零，测定 A 460 |
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