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微量法
产品内容：
提取液：60%乙醇，自备。
试剂一：液体2mL×1 管，4℃保存。
试剂二：液体2mL×1 管，4℃保存。
试剂三：液体15mL×1 瓶，4℃保存。
产品说明：
类黄酮是一类多苯化合物，属于植物次生代谢物，对人体具有，抗菌，，清除体内羟自由基，预症等作用。
在碱性亚硝酸盐溶液中，类黄酮与铝离子形成在502nm 处有特征吸收峰的红色络合物，测定样品提取液在502nm 处的吸光值，即可计算样品类黄酮含量。
自备实验用品及仪器：
天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。
操作步骤：
一、类黄酮提取
将样本烘干至恒重，粉碎，过40 目筛之后，称取约0.1g，加入2.5mL 提取液，用超声提取法进行提取，超声功率300W，破碎5s，间歇8s，60℃，提取30min，12000rpm，25℃，离心10min，取上清，用提取液定容至2.5mL，待测。
二、测定操作表
1、 分光光度计或酶标仪预热30min 以上，调节波长至502nm，蒸馏水调零。
2、 操作表
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对照管 |
测定管 |
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样本待测液（μL） |
60 |
60 |
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试剂一（μL） |
15 |
15 |
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混匀，室温静置5min |
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试剂二（μL） |
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15 |
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混匀，室温静置5min |
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试剂三（μL） |
120 |
120 |
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60%乙醇（μL） |
105 |
90 |
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混匀，室温静置15 min，取200μL 于微量石英比色皿/96 孔板中测定502nm 处吸光值。ΔA=A 测定-A 对照。 |
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