分光光度法
产品内容:
提取液:60%乙醇,自备。
试剂一:液体6mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体15mL×1 瓶,4℃保存。
产品说明:
植物酚类物质具有清除自由基,的作用,具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。
在碱性条件下,酚类物质将钨钼酸还原,产生蓝色化合物,在760nm 处有特征吸收峰,测760nm 处的吸光值,即可得样品总酚含量。
仪器设备(自备):
烘箱、粉碎仪、40目筛、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿。
操作步骤:
1、 总酚提取:
将样本烘干至恒重,粉碎,过40目筛之后,称取约0.1g,加入2.5mL提取液,用超声提取法进行提取,超声功率300W,破碎5秒,间歇8秒,60℃,提取30min。12000rpm,25℃,离心10min,取上清,用提取液定容至2.5mL,待测。
2、测定操作表:
|
对照管 |
测定管 |
样本待测液(mL) |
0.05 |
0.05 |
试剂一(mL) |
|
0.25 |
混匀,室温静置2min |
||
试剂二(mL) |
0.25 |
0.25 |
双蒸水(mL) |
0.7 |
0.45 |
混匀,室温静置10 min,双蒸水调零,波长760nm,1mL比色皿, 测定各管吸光度值(ΔA760=A测定-A对照)。 |