试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
原花色素(Oligomeric Proantho Cyanidins,OPC)是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物,广泛存在于植物的各种器官中,具有极强的性和清除自由基的作用,广泛的应用于医药,食品,化妆品,行业。
测定原理
在酸性条件下,植物原花青素A环上的间苯二酚和与香草醛发生缩合反应,产生有色化合物,在500nm处有特征吸收峰,测定500nm光吸收值,可计算植物中原花青素的含量。
自备实验用品及仪器
天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、蒸馏水、8%盐酸和60%乙醇。
试剂组成和配制
提取液:60% 乙醇,自备,4℃保存。
试剂一:8% 盐酸 20mL,自备,4℃保存。
试剂二:粉剂 0.2g×1 瓶,4℃避光保存,临用前加 20mL 双蒸水溶解。
工作液:临用前按照用量将试剂一和试剂二按照 1:1 混合。
OPC 提取
将样本烘干至恒重,粉碎,过40目筛之后,称取约0.1g,加入2.5mL提取液,用超声提取法进行提取,超声功率300W,破碎5s,间歇8s,提取30min, 12000rpm,25℃,离心 10min,取上清,用提取液定容至 2.5mL,待测。
测定操作表
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对照管 |
测定管 |
样本(μL) |
200 |
200 |
工作液(μL) |
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800 |
H2O(μL) |
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800 |
混匀,30℃水浴 30min,1mL 玻璃比色皿,对照管调零,测定 A500 。 |