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可见分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
维生素 E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是生物体中主要的剂之一，能阻止不饱和脂肪酸收到过氧化作用的损伤，维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能，具有延缓衰老、预防溶血性作用，在医药、化妆品、、食品行业
具有较高的应用价值。
测定原理
VE还原Fe3+为Fe2+ ，Fe2+与1,10-菲罗啉产生有色络合物，在530nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、漩涡震荡仪。
试剂组成和配制
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂四：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。
样本处理
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约0.2g，加入1mL提取液）加入提取液，充分匀浆后用提取液定至 2mL，在漩涡混匀仪上震荡 5min，于25℃，5000g 离心 10min，取上层测定。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议1000万细胞加入2mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；在漩涡混匀仪上震荡 5min，于25℃，5000g 离心10min，取上层测定。
3. 血清：取0.2mL，加1.9mL提取液，漩涡仪混匀上震荡5min，于25℃，5000g 离心10min，取上层测定。
测定操作
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对照管 |
测定管 |
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样品（μL） |
500 |
500 |
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试剂一（μL） |
100 |
100 |
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试剂二（μL） |
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100 |
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试剂三（μL） |
100 |
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充分混匀，25℃反应 5min |
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试剂四（μL） |
300 |
300 |
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充分混匀，于1mL玻璃比色皿，无水乙醇调零，测定530nm处吸光值，记为 A对照管和A测定管，△A=A测定管-A对照管。 |
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